深度說明細(xì)胞培養(yǎng)基的總結(jié)、定制
    CMRL-1066

    CMRL-1066于20世紀(jì)50年代由 Connaught 醫(yī)學(xué)研究實驗室在M199的基礎(chǔ)上經(jīng)過大量改進(jìn)而成，其特點為其成分以化學(xué)試劑為主，屬于非蛋白質(zhì)添加型培養(yǎng)基。zui初用來培養(yǎng)L系（Lstrain）細(xì)胞，曾經(jīng)在無蛋白質(zhì)添加的條件下連續(xù)培養(yǎng)單層細(xì)胞達(dá)數(shù)年。盡管該培養(yǎng)基開發(fā)目的為細(xì)胞提供無血清培養(yǎng)之需，但在有血清添加的條件下該培養(yǎng)基可用于支持多種細(xì)胞的生長。

    DMEM-Ham's F12 50:50 Mixture

    DMEM-Ham's F12為研究人員開發(fā)用于無血清細(xì)胞培養(yǎng)之需。取代培養(yǎng)基中的血清添加，該培養(yǎng)基添加有混合營養(yǎng)成分，生長因子和激素。Mather和Sato曾報道添加有胰島素（insulin），轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin），（表皮生長因子（epidermal growth factor），促黃體素（luteinizing hormone，LH）或者促卵泡素（follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH），類胰島素生長因子（somatomedin）和生長激素的無血清培養(yǎng)基成功培養(yǎng)了Leydig細(xì)胞和Sertoli細(xì)胞。盡管針對不同的細(xì)胞使用激素的含量不同，1:1比例混合的DMEM和Ham’s F-12對多數(shù)細(xì)胞比較適宜。15mM的HEPES常用來為該培養(yǎng)基提供酸堿緩沖體系，補償無血清添加造成的培養(yǎng)基

    緩沖能力不足。

    Leibovitz's L-15 Medium

    IscoveL-15 (Leibovitz) 培養(yǎng)基zui初開發(fā)用于非二氧化碳依賴型細(xì)胞生長環(huán)境（該環(huán)境需要碳酸氫鈉）。L-15 緩沖體系由鹽類、堿性氨基酸、和替代glucose的替代物galactose維持。L-15支持HEp-2、LLC-MK2以及原代胚胎和成人組織的體外培養(yǎng)。多種病毒在此培養(yǎng)基中也成功得以包裝。

    Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)

    Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium （DMEM）是在Basal Medium Eagle（BME）基礎(chǔ)上改進(jìn)而來。其中氨基酸濃度為BME的4倍，根據(jù)葡萄糖（glucose）的濃度高低分為“高糖（4500mg/L）”和“低糖（1000mg/L）”兩類，相對BME，DMEM含有多種添加成分。DMEM首見于小鼠胚胎細(xì)胞培養(yǎng)，其后各種改進(jìn)型廣泛用于原代細(xì)胞，非轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。各種DMEM的區(qū)別主要在于L-谷氨酰胺（L-glutamine），丙酮酸鈉（Sodium Pyruvate）的不同組合以及是否含有酚紅（Phenol red）等。

    Iscove's Modification of DMEM

    Iscove等人的研究表明紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的前體細(xì)胞（precursor cell）能夠在*無血清的培養(yǎng)基中生長，該培養(yǎng)基需要輔以albumin，transferrin，lecithin以及 selenium。 IMDM是在DMEM的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，加入selenium，氨基酸和維生素，sodium pyruvate，HEPES，以及potassium nitrate取代DMEM中的ferric nitrate。進(jìn)一步研究表明IMEM支持鼠B淋巴細(xì)胞、骨髓中的造血組織（hemopoietic tissue）、lipopolysaccharide刺激的B細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞及

    多種雜交瘤細(xì)胞等的生長。

    McCoy's (Iwakata & Grace Modification)

    1959, McCoy等報道了體外培養(yǎng)Novikoff Hepatoma細(xì)胞所需的氨基酸。他們在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上通過調(diào)整加入氨基酸的量產(chǎn)生了MCCOY'S 的配方。隨后Hsu 和Kellogg 使用這種培養(yǎng)基成功培養(yǎng)了一系列來源于多種組織的原代細(xì)胞，這些組織包括正常骨髓（bone marrow）、皮膚（skin）、牙齦（gingiva）、睪丸（testes）、小鼠腎臟（mouse kidney）、網(wǎng)膜（omentum）、腎上腺（adrenal glands）、肺（lung）、脾臟（spleen）、大鼠胚胎（ratembryos）及其它組織。

    MCDB 131

    MCDB 系列培養(yǎng)基是由Ham等人在20世紀(jì)70到80年代開發(fā)使用的，可以滿足細(xì)胞在一定激素、生長因子和微量元素或者低量透析血清條件下生長。 MCDB 131zui初用來培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMVEC）的克隆生長，還廣泛用于肝細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞及其它細(xì)胞類型的無血清條件培養(yǎng)。

    Medium 199

    早期開發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)基主要成分來源于動物或者組織抽提物，上個世紀(jì)50年代Morgan和同事報道了他們的成果，使用*由合成營養(yǎng)元素制備的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。他們在實驗中將維生素、氨基酸和其它因子按照不同方式配比，zui終得到維持體外組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基M199。然而他們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的長期培養(yǎng)需要在培養(yǎng)基中添加動物血清。通過調(diào)整適宜濃度的添加物，M199有著廣泛的用途，尤其非轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。M199通常用于病毒學(xué)研究，疫苗生產(chǎn)以及體外培養(yǎng)原代小鼠胰腺上皮和大鼠感光組織。

    Minimum Essential Medium (MEM)

    Minimum Essential Medium (MEM) 由Harry Eagle于上個世紀(jì)50年代開發(fā)的培養(yǎng)基工藝，是zui常用的細(xì)胞培養(yǎng)基之一，早期應(yīng)用于正常哺乳動物成纖維細(xì)胞和特定HeLa細(xì)胞亞系的培養(yǎng)。相對于Eagle’s Basal Medium (BME)，MEM中添加了細(xì)胞必需的營養(yǎng)成分，隨后的研究顯示這些添加的營養(yǎng)成分對大多快速增殖的細(xì)胞有促進(jìn)作用。MEM含有較高水平的氨基酸，接近于培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞的組分。MEM廣泛用于支持單層細(xì)胞的生長，選擇性添加非必需氨基酸和Hank’s/Earle’s鹽更進(jìn)一步擴大了MEM的使用范圍。另外降低培養(yǎng)基中鈣離子含量適用于懸

    浮細(xì)胞的培養(yǎng)。MEM的alpha改進(jìn)型（alpha-MEM）含有Earle’s平衡鹽、非必需氨基酸和丙酮酸鈉，并且相對于BME提高了維生素含量。該配方由Stanners等在1971年首先用于培養(yǎng)小鼠和倉鼠的雜交瘤細(xì)胞。

    Basal Medium

    由Harry Eagle 于1962年開發(fā)，Eagle's 基本培養(yǎng)基（或稱為BME）為廣泛應(yīng)用合成培養(yǎng)基之一。加入適當(dāng)?shù)奶砑觿┖罂梢杂脕碇С职ㄕ＜?xì)胞以及轉(zhuǎn)化細(xì)胞的單層細(xì)胞增殖。該培養(yǎng)基的開發(fā)是基于20世紀(jì)50年代的幾項研究成果，當(dāng)時這種基本培養(yǎng)基被用來確定細(xì)胞生長必要的營養(yǎng)成分。BME是Eagle’s Minimum Essential Medium (MEM)和Dulbecco’s Modified Eagle’sMedium (DME) 的前身，可用來培養(yǎng)二倍體或者原代哺乳動物細(xì)胞。

    RPMI 1640

    RPMI-1640是Moore等人在上個世紀(jì)60年代開發(fā)的，名字RPMI由他們當(dāng)時工作的研究所名稱的字頭縮寫組成（Roswell Park Memorial Institute）。培養(yǎng)基組分是在他們先前開發(fā)的RPMI-1630的基礎(chǔ)上改變了氨基酸和維生素的含量，緩沖體系仍然采用碳酸氫鹽（bicarbonate）系統(tǒng)。RPMI-1640曾被用來培養(yǎng)人正?；蛘弋惓Ｔ錾陌准?xì)胞。通過添加不同的成分，RPMI-1640廣泛用于支持許多種細(xì)胞的生長和增殖，為zui常用的細(xì)胞培養(yǎng)基之一。

    Nutrient Mixtures (Ham's)

    Ham's復(fù)合營養(yǎng)基zui初開發(fā)用于支持CHO、HeLa和L－細(xì)胞生長，F(xiàn)-12還用于培養(yǎng)原代大鼠肝細(xì)胞和前列腺上皮細(xì)胞增值。Ham's F-10 用于培養(yǎng)人二倍體細(xì)胞，用于染色體分析的白血細(xì)胞和大鼠、兔以及雞原代組織培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型，Ham's復(fù)合營養(yǎng)基可以單獨使用或者添加一定濃度的血清。通常液體培養(yǎng)基由碳酸氫鈉提供緩沖，細(xì)胞培養(yǎng)于5％CO2環(huán)境中；另外25mM的HEPES添加對培養(yǎng)基pH值有穩(wěn)定作用。F12K為F-12的Kaighn's改進(jìn)型，區(qū)別在于提高了氨基酸和丙酮酸的含量，主要用來培養(yǎng)分化的大鼠和雞細(xì)胞以及原代人肝細(xì)胞的生長。